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Cryo-tomographie électronique de spécimens vitrifiés en films minces

CNRS Formation Entreprises
Résumé
5 Jours
2 400 EUR
Particuliers (Inter)
Prochaine session : 16/09/2019 - Rennes

Objectifs visés

- Acquérir les bases théoriques de la cryo-tomographie électronique
- Savoir préparer un spécimen vitrifié en présence de marqueurs fiduciaires (nanoparticules d'or)
- Savoir acquérir des séries d'images inclinées en faible dose d'électrons
- Savoir reconstruire en 3D des cryo-tomogrammes à partir de séries d'images inclinées

Contenu

L'objectif de ce stage essentiellement pratique est d'apporter suffisamment d'autonomie aux stagiaires afin qu'ils puissent mettre en œuvre la cryo-tomographie électronique dans leur service ou participer à des acquisitions et/ou analyses sur des plateformes de cryo-microscopie électronique de partenaires.

Cours (4 h)
- Introduction à la microscopie électronique
- Introduction à la cryo-tomographie électronique
- Limites et perspectives de la cryo-tomographie électronique

Ateliers pratiques (27 h)
- Préparation des spécimens en présence de marqueurs fiduciaires
- Vitrification des spécimens en films minces
- Acquisition de données par cryo-tomographie électronique simple axe
- Reconstructions 3D à l'aide du logiciel IMOD
- Analyse des données sous 3Dmod
- Visualisation sous UCSF Chimera

Les échantillons biologiques (virus, axonèmes...) seront fournis lors de la formation.

La dernière demi-journée (4 h) sera consacrée à l'analyse de cas posés par les stagiaires (questions spécifiques, éventuelles problématiques professionnelles, etc.)

Public cible/ Prérequis


Bases théoriques en microscopie électronique en transmission

Formation qualifiante/diplômante/certifiante?

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

Moyens Pédagogiques

- Appareil de vitrification sous atmosphère contrôlée (Leica EM GP)
- Cryo-microscope électronique 200 kV équipé d'une caméra CCD (Tecnai G2 T20 Sphera, Gatan USC4000)
- Stations graphiques (Mac Pro équipés de cartes graphiques NVIDIA)

Faire une demande

 

Contact

CNRS Formation Entreprises

Avenue de la Terrasse
91190 Gif-sur-Yvette Cedex

 Afficher le numéro
cnrsformation.cnrs.fr

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