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Le dichroïsme circulaire et ses applications en biochimie

CNRS Formation Entreprises
Résumé
2 Jours
900 EUR
Particuliers (Inter)

Objectifs visés

- Connaître les applications possibles du dichroïsme circulaire pour l'étude et la caractérisation des protéines, des complexes protéine-ligand, des complexes protéine-protéine et des acides nucléiques
- Acquérir les connaissances de base (théoriques et pratiques) nécessaires pour utiliser la technique du dichroïsme circulaire : appréhender les possibilités et identifier leurs limites
- Savoir utiliser le dichroïsme circulaire dans des conditions biochimiques et savoir repousser les limitations dues à l'instrumentation pour acquérir des données dans des tampons et salinités d'intérêt biologique et « inappropriés » pour le dichroïsme circulaire

Contenu

Cours (30 % du temps)
- Les bases théoriques du dichroïsme circulaire
- Le dichroïsme circulaire pour l'étude des protéines :
. détermination du contenu en structures secondaires
. suivi des repliements tertiaire et quaternaire
. mesures de stabilité
. analyse des changements conformationnels
. analyse des complexes protéine-ligand ou protéine-protéine
- Les logiciels pour l'exploitation des données de dichroïsme circulaire
- Aperçu des autres méthodes biophysiques complémentaires au dichroïsme circulaire

Travaux pratiques (70 % du temps)
- Préparation d'échantillons idéaux et complexes
- Détermination des paramètres d'acquisition :
. en fonction des résultats escomptés (détermination de structures secondaires ou mesure de variations structurales, stabilité...)
. choix des concentrations
. types de cuves
. limite d'enregistrement des spectres (notion de saturation du signal)
- Utilisation de l'appareil et mesures de spectres
- Exploitation des données
- Utilisation de programmes de déconvolution, comparaison des méthodes et des bases de référence
- Robustesse de l'analyse et fiabilité des résultats

Public cible/ Prérequis


Connaissances de base en spectroscopie et avoir manipulé des protéines et/ou des acides nucléiques

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